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    吕小姐

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    广东 深圳市 南山区

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    技术服务、细胞库 / 细胞培养、试剂

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大小鼠鞘内注射教学

1682 人阅读发布时间:2025-05-16 11:16

在神经科学、药理学等实验中,鞘内注射是将药物直接输送至中枢神经系统的 “精准给药术”。

今天就为大家详解大小鼠鞘内注射的全流程,附避坑指南,新手也能轻松上手!

 

一、科普小课堂:鞘内注射是什么?

简单来说,就是通过腰穿把药物直接注射到脊髓周围的鞘膜(脑脊液循环系统)中,让药物随脑脊液快速扩散,直接作用于中枢神经系统。
 优势:避开血脑屏障,药物起效快、局部浓度高,是研究神经系统疾病的 “黄金手段”。

 

二、操作前准备:这些细节别忽视!

 

# 1. 实验动物选择

  • 小鼠:成年鼠,体重 18-25g(太轻易损伤,太重定位难)

  • 大鼠:成年鼠,体重 200-300g(体型适中,操作稳定性高)

 

# 2.器械试剂清单(划重点!)

✅ 必备工具:

  • 剃毛器(备皮超重要!)、碘伏(消毒 3 遍!)、加热垫(维持体温,防低温应激)

  • 微量注射器30G-33G 针头,细针减少组织损伤)

  • 麻醉剂异氟烷(推荐!气麻可控性强,苏醒快)

 

三、8 步操作流程:手把手教你定位给药

 

01
麻醉管理
  • 诱导期:3-5% 异氟烷(快速麻醉,避免动物挣扎)

  • 维持期:1-2% 异氟烷(保持浅麻醉状态,防呼吸抑制)


⚠️ 关键:全程监测呼吸频率,避免麻醉过深!

图片

 

02
 体位固定

俯卧位,四肢展开固定,脊柱自然弯曲。

(重点!L5-L6 间隙定位更清晰)

 

03
 备皮消毒
  • 小鼠:直接剃毛;

  • 大鼠:可剪开背部皮肤(约 1cm 小口,暴露脊柱)

碘伏以注射点为中心,由内向外环形消毒 3 次

 

04
精准定位 —— 成败关键!

定位标志:髂嵴连线稍上方的 L5-L6 间隙(用镊子轻戳,触感凹陷处;大鼠可触摸棘突,两棘突间凹陷即为穿刺点)

 

💡 小技巧:轻轻提拉尾巴,间隙会更明显!

 

image.png

 

05
进针与注射
  • 针头垂直刺入,突破黄韧带时会有 “落空感”,同时鼠尾可能摆动(成功信号!)

  • 注射量:小鼠≤10μl,大鼠≤30μl(速度要慢!过快导致脑脊液压力骤升)

  • 拔针:停留 3 秒再缓慢拔出,防药物反流。

 

06
术后处理
  • 大鼠剪皮注射者:缝合皮肤(4-0 缝线),碘伏二次消毒

  • 放置加热垫:等待苏醒,维持体温 37℃左右

 

四、避坑指南:这 5 个雷区别踩!
⚠️ 1. 定位错误 = 前功尽弃
进针过深损伤脊髓,可能导致后肢瘫痪!务必确认 L5-L6 间隙避免刺入 L4 以下

 

⚠️ 2. 无菌操作不严 = 术后感染
所有器械高温灭菌,消毒范围≥5cm,术后观察 3 天有无红肿化脓。

 

⚠️ 3. 麻醉过量 = 动物死亡
异氟烷维持期不超过 2%,呼吸频率<80 次 / 分需警惕,立即降低浓度 + 辅助通气。

 

⚠️ 4. 注射速度过快 = 实验误差
推注时间≥10 秒,匀速给药,避免引起动物剧烈应激反应。

 

⚠️ 5. 术后观察缺位 = 数据偏差
苏醒后观察 30 分钟:站立不稳?后肢无力?立即记录,严重者需处理(避免痛苦)。

 

 

五、成功关键:解剖图 + 视频参考

 

image.png
图片

 

注射成功后的解剖图

 

 

 

六、总结口诀(建议收藏!)

定位准、麻醉稳,

消毒三遍别偷懒;

慢推慢注防反流,

术后观察要耐心。

图片

 

掌握这几点,鞘内注射成功率提升 90%!你在操作中遇到过哪些难题?欢迎在评论区留言讨论~

 

关注我们,获取更多实验技术干货,下期带你解锁 “实验小鼠繁育饲养全攻略:科学管理助力科研精准!”~

 

本文仅供科研操作参考,具体实验需遵循动物伦理规范,建议在专业人员指导下进行。

 

作者 | 韦如月

编辑 | 翁小云

审核 | 韦云婷

统筹制作 | 深圳灵赋拓普生物科技有限公司

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关于灵赋拓普

    深圳灵赋拓普生物科技有限公司(简称灵赋拓普)成立于2015年,是一家专注动物科研,服务临床前研究与评价的创新型CRO企业。公司以动物模型为核心,同时开展细胞、病理、蛋白、分子、生化、行为学等一站式服务,赋能生命科学和生物医药研究。灵赋拓普在深圳南山、光明、坪山及广州拥有研发基地及实验动物中心,提供医疗器械评价、大小动物模型开发、药物筛选与评价、动物饲养等临床前CRO服务。先后获得国家高新技术企业、专精特新企业、质量管理体系等荣誉认证。公司具有核心研发和专业技术团队,致力于成为全国动物科研服务领跑品牌,实现“愿天下没有难治的疾病”的美好愿景。

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