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103 人阅读发布时间:2026-04-24 17:44
做小鼠、大鼠的药代动力学实验,方案写得再漂亮,上手一哆嗦,数据全白费。今天不讲理论,只讲落地操作—— 怎么做、注意什么、哪里最容易翻车,新手照着做也能稳出数据。
一、给药操作:IV / PO 核心手法
静脉注射(IV,尾静脉最常用)
小鼠必须充分加温扩血管:用红外灯或42℃水浴袋热敷尾巴1-2分钟,血管呈粉红色再扎。
进针点选尾侧静脉(左右两侧),30G胰岛素针,针尖斜面朝上,与尾约10-15°角进针。
标志:推注时阻力小,药液走行一段后消失。若局部发白鼓包 → 失败,数据不能用。
推注速度:10秒左右推完(体积5-10 mL/kg),太快会一过性低血压/死亡。

口服灌胃(PO)
用弯头灌胃针(小鼠20-22G,大鼠16-18G),针头长度按动物大小预量:小鼠约2.5-3 cm,大鼠约5-6 cm。
关键手法:小鼠头颈与身体成一直线,针沿上颚入,过喉头时有“落空感”,进针无阻力。
二、采血操作:不同部位怎么选?

采血通用原则
全血采集后立即4℃离心(3000-4000 rpm,10 min),取上清血浆,1小时内离心完毕,否则药物降解。
三、样本处理与保存:别让辛苦白费
血浆分离后:分装到标记好的离心管,-80℃保存(短期可-20℃,但推荐-80℃)。
避光药物:全程使用棕色管或在暗处操作(如硝苯地平、氯丙嗪等光敏药物)。
溶血样本:肉眼可见红色血浆 → 作废,必须重采(溶血会释放胞内酶和药物结合蛋白)。
四、时间点操作节奏(以IV+PO交叉设计为例)
密集采血期(前 30 分钟):每个点误差 不超过≤30 秒 ,建议 2 人操作:1人固定动物+采血,1人计时记录;
中后期(1–8 小时):误差可放宽至 2–5 分钟,但仍需准确记录实际采血时间(用于后续PK计算);
小技巧:提前按时间点 / 动物编号标记离心管,按顺序摆冰盒,采一个走一个,不慌乱。

五、最容易翻车的 3 个细节
IV推注后拔针出血 → 用干棉球轻压尾静脉进针点30秒,否则药液随血流出,剂量不准;
小鼠眼眶采血后死亡 → 进针深度过深(>5 mm)损伤视神经或脑组织。控制深度3-4 mm,旋转进针而非直捅;
血浆反复冻融 → 每次冻融降解约10-30%,全程最多冻融1次,分装成单次用量小管。
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